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888真人官网 mRNA在AngⅡ开说HUVEC细胞生活/凋故中

2018-08-22 09:05 来源: 未知 浏览:次
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  【摘要】:

  【目的】讨论NF-κB mRNA在血管生厌乱斋Ⅱ(AngⅡ)开说人脐动脉内皮细胞(HUVEC)生活/凋故中的表臻切磋。【方法】体外面培育HUVEC细胞,试验分组:正日对照组、AngⅡ处理组和Gliotoxin干涉组。采取改革的四噻唑蓝(MTT)比色法不清雅察0.01μM、0.1μM、1μM和10μM AngⅡ区别干用于HUVEC细胞6h、12h、18h和24h时细胞活性情景。运用光学露微镜不清雅察不一浓度AngⅡ干用于HUVEC细胞样儿子学变募化。运用琼脂糖凝胶电泳检测不一浓度AngⅡ区别干用于HUVEC细胞的“Ladder”图。运用流动式细胞仪检测不一浓度AngⅡ区别干用于HUVEC细胞的凋故比值。叛逆转录-凑合酶链反应(RT-PCR)技术检测叁种AngⅡ浓度(0.1μM、1μM和10μM)区别干用于HUVEC细胞0.5h、1h、2h和4h时NF-κB p65 mRNA表臻情景。运用SPSS12.0终止统计学剖析,数据采取单要斋方差剖析,遂后用q检验终止两两比较,以P<0.05论断差异具拥有统计学意思。【结实】试验结实标注皓:(1)1μM AngⅡ干用24h和10μM AngⅡ干用12h~24h时,细胞活性清楚投降低,与正日对照组比较差异拥有统计学意思(P<0.05)。0.1mg/L Gliotoxin却拮抗AngⅡ对HUVEC长的干用,细胞活性清楚添加以,与AngⅡ处理组比较差异拥有统计学意思(P<0.05),而与正日对照组比较拟差异无统计学意思(P>0.05)。(2)琼脂糖凝胶电泳结实标注皓:10μM AngⅡ干用于HUVEC细胞24h,细胞突发凋故,电泳泳道上出产即兴清楚的“梯”状条带。(3)流动式细胞结实标注皓:与正日组比较,10μM AngⅡ干用细胞24h后细胞凋故比值清楚高于正日组,差异具拥有统计学意思(P<0.05);Gliotoxin干涉组细胞凋故比值与正日对照组比较差异无统计学意思(P>0.05)。(4)半定量RT-PCR结实露示:AngⅡ(0.1μM、1μM和10μM)干用于HUVEC细胞0.5h时,HUVEC细胞中NF-κB p65 mRNA对立表臻质变募化不清楚,与正日对照组比较差异无统计学意思(P>0.05);10μMAngⅡ组干用1h、2h和4h时与正日组比较拟,NF-κBp65 mRNA对立表臻量差异拥有统计学意思(P<0.05);AngⅡ(0.1μm和1μM)组干用2h和4h时与正日组比较,HUVEC细胞中NF-κBp65mRNA对立表臻量差异拥有统计学意思(P<0.05);与0.1μMAngⅡ组比较拟,10μM AngⅡ组干用2h和4h时HUVEC细胞中NF-κBp65 mRNA对立表臻量的差异拥有统计学意思(P<0.05)。【定论】(1)AngⅡ却以惹宗HUVEC细胞样儿子改触动,细胞活性投降低,细胞凋故比值增高,DNA断裂呈“梯”状条带,其程度与AngⅡ呈剂量依顶赖性。(2)NF-κB特异性按捺剂Gliotoxin却以拮抗AngⅡ对HUVEC细胞按捺长和推向凋故干用。(3)AngⅡ却以干为HUVEC细胞中NF-κBp65 mRNA的开说剂,跟遂AngⅡ的浓度添加以而NF-κBp65 mRNA的表臻添加以,NF-κBp65 mRNA表臻在AngⅡ调控HUVEC细胞生活/凋故经过中能宗干用。

  文字到来源:http://cdmd.cnki.com.cn/Article/CDMD-10678-2007127151.htm

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